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原理
分光光度計采用個可以產(chǎn)生多個波長的光源，通過系列分光裝置，從而產(chǎn)生定波長的光源，光線透過測試的樣品后，分光線被吸收，計算樣品的吸光值，從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。

單色光輻射穿過被測物質溶液時，被該物質吸收的量與該物質的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比，其關系如下式:

A=-lg(I/I。)=-lgT=kLc

式中 :A 為吸光度;

I。為入射的單色光強度;

I 為透射的單色光強度;

T 為物質的透射率;

k 為摩爾吸收系數(shù);

L 為被分析物質的光程，即比色皿的邊長;

c 為物質的濃度;

物質對光的選擇性吸收波長，以及相應的吸收系數(shù)是該物質的物理常數(shù)。當已知某純物質在定條件下的吸收系數(shù)后可用同樣條件將該供試品配成溶液，測定其吸收度,即可由上式計算出供試品中該物質的含量。在可見光區(qū)，除某些物質對光有吸收外，很多物質本身并沒有吸收但可在定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過處理使其顯色后再測定,故又稱比色分析。由于顯色時影響呈色深淺的因素較多，且常使用單色光純度較差的儀器，故測定時應用標準品或對照品同時操作。

操作使用方法
1.接通電源，打開儀器開關，掀開樣品室暗箱蓋，預熱10分鐘。

2.將靈敏度開關調至"1"檔(若零點調節(jié)器調不到"0"時，需選用較。)

3.根據(jù)所需波長轉動波長選擇鈕。

4.將液及測定液分別倒入比色杯3/4處，用擦鏡紙擦清外壁，放入樣品室內(nèi)，使管對準光路。

5.在暗箱蓋開啟狀態(tài)下調節(jié)零點調節(jié)器，使讀數(shù)盤針向t=0處。

6.蓋上暗箱蓋，調節(jié)"100"調節(jié)器，使管的t=100，針穩(wěn)定后逐步拉出樣品滑竿，分別讀出測定管的光密度值，并記錄。

7.比色畢，關上電源，取出比色皿洗凈，樣品室用軟布或軟紙擦凈。

注意事項

1.該儀器應放在干燥的房間內(nèi)，使用時放置在堅固平穩(wěn)的作臺上，室內(nèi)照明不宜太強。熱天時不能用電扇直接向儀器吹風，防止燈泡燈絲發(fā)亮不穩(wěn)定。

2.使用本儀器前，使用者應該了解本儀器的結構和作原理，以及各個操縱旋鈕之能。在未按通電源之前，應該對儀器的安性能行檢查，電源接線應牢固，通電也要良好，各個調節(jié)旋鈕的起始位置應該正確，然后再按通電源開關。

3.在儀器尚未接通電源時，電表針于"0"刻線上，若不是這種情況，則可以用電表上的校正螺絲行調節(jié)。

日常維護

分析儀器作者要懂得儀器的日常維護和對主要標的簡易測試方法，自己經(jīng)常對儀器行維護和測試，以保證儀器作在狀態(tài)。

、溫度和濕度是影響儀器性能的重要因素。他們可以引起機械件的銹蝕，使金屬鏡面的光潔度下降，引起儀器機械分的誤差或性能下降;成光學件如光柵、反射鏡、聚焦鏡等的鋁膜銹蝕，產(chǎn)生光能不足、雜散光、噪聲等，甚至儀器停止作，從而影響儀器壽命。維護保養(yǎng)時應定期加以校正。應具備四季恒濕的儀器室，配置恒溫設備，別是地處南方地區(qū)的實驗室。

二、環(huán)境中的塵埃和腐蝕性氣體亦可以影響機械系統(tǒng)的靈活性、降低各種限位開關、按鍵、光電偶合器的可靠性，也是成學件鋁膜銹蝕的原因之。因此定期清潔，保障環(huán)境和儀器室內(nèi)衛(wèi)生條件，防塵。

三、儀器使用定周期后，內(nèi)會積累定量的塵埃，由維修程師或在程師導下定期開啟儀器外罩對內(nèi)行除塵作，同時將各發(fā)熱元件的散熱器重新緊固，對光學盒的密封窗口行清潔，時對光路行校準，對機械分行清潔和的潤滑，后，恢復原狀，再行些的檢測、調校與記錄。